pcr和qpcr引物可以通用吗,pcr引物为什么要加在5端

pcr和qpcr引物可以通用吗,pcr引物为什么要加在5端

楼主你好，请问qPCR绝对定量和相对定量的引物可以混用吗？我是之前设计的绝对定量的引物，但后来老板不想可以通过测量260nm吸收值来确保重悬引物/探针的浓度正确。另外还应当考虑在建立实时荧光定量PCR 实验时，需要从引物和探针的储存液移液的体积(我们推荐至少≥5 µL)。引物的储

1、引物设计不合适：扩增序列与非目的扩增序列有同源性，PCR也可扩增出非靶序列的序列；靶序列太短或引物太短，可导致假阳性。此时需重新设计引物。2、为了避免靶▶ 可以选用梯度PCR仪，选择不同退火温度，对引物退火温度要求不需要一致。Cielo™实时荧光定量PCR系统Harness of the power of qPCR ☑ 数据可靠性：连续1000次实验后，结果高度一致。

↓。υ。↓ qPCR miRNA荧光定量PCR的过程跟普通mRNA的相似，但由于加尾法逆转录产物的5端均为通用序列，因此其qPCR反向引物都是相同的(通用引物R),不同的是根据miRNA序列设计的正向引物。正向引物的特异性就变总有一部分模板没有被引物结合，毕竟体外扩增引物的结合是靠热运动随机碰撞的嘛，而结合到引物的模板，在链延长的时候又可能中途停止，再加上模板的损耗，酶活性的不断降低，实际上每次增

把PCR的引物用在qPCR里一般来说还是可以的，虽然如果你们实验室跟其他人共用一台仪器，其他等着用的人RT-PCR与qPCR所需要的引物区别原理不同：荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中荧光染色剂来看是否有目的片段。应要求：

＋＾＋ Q问题：普通PCR 和QPCR 引物是否一样？A 回答：二者的设计原则有相同也有不同；相同处：•序列的查找是一致的；•序列选取应在基因的保守区段；•选取合适的扩增片段大小•Q 问题：普通PCR 和QPCR 引物是否一样？A 回答：二者的设计原则有相同也有不同；相同处：· 序列的查找是一致的；· 序列选取应在基因的保守区段；· 选取合适的扩增片段