pcr不出结果是为什么,pcr能检查出哪几种病

pcr实验失败的几种情况 2023-12-20 16:38 775 墨鱼

pcr实验失败的几种情况

pcr不出结果是为什么,pcr能检查出哪几种病

可能的原因和对应的解决方案如下：1.引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。2.循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。3.酶的用量偏高或酶的引物，是进行荧光定量实验的必备条件。其特异性的问题可通过「BLAST」搞定，让人比较头痛的是引物可以形成「发夹结构」或「二聚体」即在<75℃ 时出现溶解曲线的峰),影响扩增效

其实，根据慧登生物多年实验经验，影响pcr实验结果的原因主要是以下几种：引物的选择、酶及其浓度、dNTP的质量与浓度、模板(靶基因)核酸、Mg2+浓度、温度与时间的设置、循环次其一，个体差异，窗口期长短不一；其二，存在排毒间歇期，在未排毒时采样，就不会采集到病毒，病毒也有休息的时候；其三，新冠病毒主要感染部位在肺部，存在咽部病毒量较少的情况，此时也不

是模板的问题了，因为之前我做也是试了很多条件，酶也换过，mix和分开的Taq都用过，体系也换过，就是出不来，后来重新提了rna反转录之后，一下就出来了，我感觉优化条件是在有条带的情况之下才考虑的，连带cDNA不是转录合成的吗？

关注救救我吧，qPCR的CT值为啥全出不来so sad又在挨骂的边缘疯狂试探，谁来救救我图二是我刚跑的qPCR,ct值全没出来图三是我测得RNA浓度图四是我测得cDNA浓度rna提取的时间有点久了，任何检测手段都具有一定的敏感性和特异性，因此不能指望临床医学存在绝对肯定的事情。如果有问题，需要及时

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