荧光定量pcr没有ct值,荧光定量pcr阴性对照有ct值

荧光定量pcr没有ct值,荧光定量pcr阴性对照有ct值

●＾● 在荧光定量PCR中，CT值是一个重要的指标，用于衡量目标DNA在PCR反应中的起始浓度。CT值全称为Cycle Threshold值，它代表了PCR反应中所需的循环数，以使荧光信号达到设定的阈值。1、循环数不够(一般不超过45循环，不仅背景值提高，定量也不准); 2、PCR程序设置错误，检测荧光信号的步骤有误。一般SG法采用72℃延伸时采集，TaqMan法则一般在退

steponeplus荧光定量pcr仪ct值没有的原因如下。1、循环数不够（一般不超过45循环，不仅背景值提高，定量也不准）。2、PCR程序设置错误，检测荧光信号的步骤有误，手动设置：大于荧光背景值和阴性对照的荧光最高值；进入指数期的最初阶段真正的信号：荧光信号超过域值Rn（荧光强度）Log－linerphaseBaseline Log－linerphaseThreshold Cy

荧光定量PCR（qPCR）的相对定量计算公式可以通过比较待测基因和内参基因的CT值（荧光信号阈值）来得到。每个循环结束时，收集荧光信号强度，通过将荧光强度与循环数作图，qPCR仪生成扩增曲线，其表示在整个PCR过程中产物的累积，通过这个过程，即可实现量化。如果样品中特定的序列(DNA或RNA)丰

╯▽╰ 这个时候系统会默认所有孔参与荧光定量PCR实验。导致CT值错误。如果我们把无样品C-H 行数的target和sample 前面的“√”清除后重新分析计算，就会得到正常求问qRT-PCR的时候，经常出现CT值很高，有30左右，熔解曲线正常无杂峰，这种情况是退火温度的问题，还是模板浓度呢？怎么处理合适呀#实时荧光定量PCR#研究生日常#实验室日常2022-10-12

荧光定量PCR实验中无Ct值出现的原因(1)反应的循环数不够：一般要在35个循环以上，但是过多的循环次数可增加背景值。2)检测荧光信号的步骤有误：SYB-Rgreen法(这个时候系统会默认所有孔参与荧光定量PCR实验。导致CT值错误。如果我们把无样品C-H行数的target和sample前面的“√”清除后重新分析计算，就会得到正常的荧光