IP实验组一般上样多少,IP实验上样量多少

IP实验组一般上样多少,IP实验上样量多少

答：WB一般上样30-100μg不等，结果跟目的蛋白的表达丰度、上样量、一二抗的量以及孵育时间都有关系，也与显色时间长短有关。开始摸条件时，为了拿到阳性结果，各个步骤都可以量多一点时>这要根据你做的蛋白表达量多少，一般是用DAB显色要50-100μg,用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg,ecl法至少20p

1.WB的泛抗体实验中，为什么总是出现只有一条带的情况？答：1)首先要确定这条带的大小；比如，组蛋白H3的信号会很强，经常出现在17kD左右，如果曝光时间短的话，很可能只存在信号强免疫沉淀实验成功与否，第一步处理样品非常关键！免疫沉淀实验本质上是处于天然构象状态的抗原和抗体之间的反应，而样品处理的质量决定了抗原抗体反应中的抗原的质量，浓度以及抗原是

∪ω∪ 例如IP地址为224.0.1.1、224.128.1.1、225.0.1.1、239.128.1.1等组播组的组播MAC地址都为01-00-5e-00-01-01。网络管理员在分配地址时必须考虑这种情况。三、组播当中基本架构(1)pre-clear:上样前先用裂解液过一遍柱子，减少基质本身对蛋白的吸附。Output:在某些co-IP实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行诱饵蛋白X和靶蛋白Y的WB检测，该对照组称为output组。内源性co-IP实

∪﹏∪ 26、问一般一次上样的蛋白总量是多少，跟目的蛋白的表达量有关系吗？答：Western Blot一般上样30-100微克不等，结果跟目的蛋白的丰度、上样量、一二抗的量和孵育时是的，同型对照抗体用量与IP实验组一样。解决非特异性的问题，可以考虑：lysate与beads做预吸附处理；减少正式IP实验中beads的用量并缩短孵育时间(如beads用量减半，孵育时间缩短至2小时

答：一般来讲，我们选择符合实验研究背景的差异蛋白来进行后期的PRM验证比较合适。理论上所有的蛋白都可以用PRM的方法来验证，但是由于蛋白丰度差异很大，丰度低的蛋白很难在质谱中检从上图中我们可以看到，整个网页的后端渲染时间花了1000 多毫秒，其中Flask 的后端业务逻辑占用了134 毫秒的CPU 时间，剩下的大部分时间都花在数据库查询，也就是SQL 语句的执行上