pcr产物全是引物二聚体,跑胶引物二聚体

pcr产物全是引物二聚体,跑胶引物二聚体

引物二聚体的出现是必然的，只是或多或少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我们的肉眼看不到而已。提高PCR严谨性(包括提高退火温度，降低引物浓度等)可大大降低二首先在设计引物的时候，要注意避免产生引物二聚体.现在的引物设计都会有一个dimer的选项，可以看出你设计的引物是否会发生二聚体.如果会形成二聚体，并且序列不能有大的变动，那就注意

ˇ０ˇ 1、引物二聚体是引物的3端间相互错配扩增形成的。2、引物二聚体的出现是必然的，只是或多或少的问题，电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现，只是含量低我们的肉眼答：每个基因序列长短不一，有的好几kb,有的几百bp,但是我们在设计引物的时候只需要要求产物长度80-300bp,太短或者太长都不适合做荧光定量PCR检测。产物片段太短，无法跟引物二聚体区

如果引物没有问题，建议做一个退火温度在45-55度之间的梯度PCR. wiwi(2015-11-10 16:41:09) 引物是用Primer Premier 5.00 设计的，评分100。jude(2015-11-10 1也就是说，引物的形成是不需要模板的参与的，所以我们只需要在电泳的时候添加一组对照就可以有效的判断是否有引物二聚体的形成，以及如果有引物二聚体的形成，它

最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带，我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1ul (浓度10uM/L)pcr mix 10ul (用过biote2、确认反转录和pcr过程中试剂有没有问题，如果你这个实验是重复性的，就是说同样的引物试剂程序设置，

估计没连上，你换对引物试试，或多筛几个菌。18761615793 请问你的模板是什么？扩增用的酶是什么？chenguestc 切胶时用的是60,为什么做菌液时就提高了温度呢？? PCR反应体系的配制在冰上进行，最后加TAq酶，PCR结束后，产物勿放置在室温下过长时间，有人认为室温下有些TAQ酶会将多余的引物合成为二聚体；8.增加循环数；9.降低