qpcr中2–ΔΔCT怎么算,qPCR数据分析

qpcr中2–ΔΔCT怎么算,qPCR数据分析

ΔΔCT = ΔCT(test) – ΔCT(calibrator)最后，计算表达⽔平⽐率：2–ΔΔCT = 表达量的⽐值计算模板建⽴ ⽽现在我们现在⽤的这款仪器QuantStudio 7 Flex Real-Time PCR Sy2. 37摄氏度孵育10min。3. 终止交联：加甘氨酸至终浓度为0.125 M。450ul 2.5 M甘氨酸于平皿

ˇ﹏ˇ 2-△ct法的计算过程包括以下几个方面：首先，选择一个或多个内部参照基因，这些基因在所有样本中都以相同的相对比例表达。内部参照基因通常选择在稳定表达的基因，然后根据这个量来计算你的基因在不同样品中的表达量。所以每一个都需要单独的样品。基因组干扰需要你在提取RNA以后用DNase处理样品。如果不放心，可以拿处理过的

2—ΔΔCT这个是只能正数没错，但是这个值是Foldchange，你得取对数呀，log2处理后，那些小于1的不就5、计算2^(-ΔΔCt)(图3.5) 2^{-\Delta\Delta CT}方法的基本思想是，将ΔΔCT转换为相对表达量的指数形式，即2的负ΔΔCT次方。这是因为，在qPCR实验中，每个CT值的增加相当于RNA模板数

ΔCt [normalized IP] = (Ct [IP] - (Ct [Input] -Log2 (Input Dilution Factor))) % Input = 2 ^(-ΔCt [normalized IP])*100% 我们的input通常为总量的1/10,即稀释了10倍，Log2 (IQPCR算法(相对定量，2-Ct法)算法：1目的基因Ct值-内参基因Ct值，2 待测样品Ct值-对照样品Ct值，3 差值的负值取对数。公式：RQ= = = AssayACTBgene1123sample116.21 2

很简单，对上面推导得到的所有样本和control组的2^(-△Ct),均除以control组的2^(-△Ct),即可得到2^(-△△Ct);好，到这里，就明白了qPCR数据分析中△△Ct法的计算原理及推导过程。3️⃣具体怎么处理，⚠️首先说一下定量数据计算的两种不同的值，一种是2−ΔCt,另一种是2−ΔΔCt,根据自己实验室的要求进行选择，或者两种都算，两种不同算法的值都进行做图，因为你的结果以后很可能会发