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用双缩脲试剂检测蛋白质的原理 |
双缩脲检验蛋白质的原理,双缩脲是检测什么的
双缩脲就是缩二脲,就是两个尿素分子缩合,脱去一分子氨所形成的化合物,结构简式:也可写成“NH2CONHCONH2”),双缩脲可以和硫酸铜反应,生成紫色的物质,可能是由于双缩脲在碱性溶液中可与铜离子产生紫色络合物,这一反应称为双缩脲反应,因为蛋白质中含有多个肽键,也能与铜离子发生双缩脲反应,且颜色深浅与蛋白质含量在一定范围内
双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色配合物,此反应称为双缩脲反应,由于蛋白质分子中含有肽键,与双缩脲结构相似,故也能呈现此反应而生成紫红色配合物,在一定条件下其颜蛋白质的肽键与双缩尿类似,可与铜离子在碱性环境下(双缩尿试剂)生成紫色络合物.稀氢氧化铜溶液(斐林试剂)有弱氧化
≥0≤ 双缩脲试剂是一种常用于检测蛋白质的试剂。其原理基于蛋白质与双缩脲(DTT)和碘乙酸(IAA)反应后,形成交联的蛋白质分子。1. 双缩脲会与蛋白质的二硫键反应,将二硫键还原为两个蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂.双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01
“双缩脲试剂与含两个或两个以上肽键的化合物会形成紫色络合物。”这句话解决了我多年以来的疑惑。原理蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈现正比关系。实验目的学会使用威尼尔分光光度计制作标准曲线掌
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