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histag标签的作用,6his标签
这些作用包括配价键结合、静电吸附、共价键结合等,其中以6个组氨suan残基组合的融合标签(His-Tag)在原核蛋白表达中的应用最为显著。His-Tag可结合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特个组氨酸的多肽,制备的抗His-tag 抗体可特异性的识别融合蛋⽩的His 标签,可⽤于融合蛋⽩表达的检测或纯化His 标签融合蛋⽩。抗体具有⾼灵敏度,⾼特异性和⾼亲和⼒。His-Ta
3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;4.His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体;5.可应用于多种表达系统,纯化的条件His-tag单抗可以⽤来鉴定His-tag的蛋⽩质的表达情况(如⽬的蛋⽩的相对表达量、分⼦量)、在细胞中的定位以及其它特性。His-tag 作为蛋⽩纯化时的⾸选标签,其优势在于:
His tag是基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链,在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用(如Ni离子,Zn离子,Co离子等),从而达到纯化蛋白的作用,它是目前其作为标签,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分
在标签蛋白纯化过程中,合适的标签不但有利于蛋白的纯化,促进蛋白的可溶性,同时还不能影响蛋白的结构功能和下游应用。His-Tag(组氨酸标签) His-Tag(组氨酸标签His标签(His-Tag)可与多种金属离子发生特殊的相互作用,如Ca2+、Mg2+、Ni2+、Cu2+,Fe3+等,其原理是利用蛋白质表面的特性,使之被吸附在凝胶柱上,从而达到分离纯化蛋白的目的。His标签
His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。L蛋白首先从大链球菌菌种表面分离得到,通过L链相互作用与免疫球蛋白5.His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫并制备抗体;6.可应用于多种蛋白表达系统,可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签表达;7.采
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