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菌液pcr没有条带的原因,菌液pcr为什么会出现多条带

为什么菌液可以直接pcr 2023-06-04 20:49 384 墨鱼
为什么菌液可以直接pcr

菌液pcr没有条带的原因,菌液pcr为什么会出现多条带

原因是有多种可能的。没有条带的原因可能有1.模板的含量低或者含有抑制物;2.Buffer对样品不合适;3菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个.假阳性出现的原因关键在于做连接的时候

菌液pcr没有条带的原因酶

有时还有必要用标准的温度计,检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度,这也是PCR失败的原因之一。靶序列变异:如靶序列发生突变或缺失,影响引物与模板我也出现过这种菌液PCR没有条带的情况。分析的话应该是大肠杆菌感受态的问题。你是自己制备的感受态还是

菌液pcr没有条带的原因是什么

推测很可能是平板上残留的连接液中的未连接上载体的目的条带引起的说来也很奇怪以前我就是挑菌后加到lb液后摇菌然后以菌液为模板进行pcr再以阳性管提取质粒进行酶切鉴定排除如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组。建议提细菌的genomeDNA做一次PCR。如果是阳性,就说明是这样。另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增。

菌液pcr没有条带的原因有哪些

物理原因:变性对PCR扩增来说相当重要,如变性温度低,变性时间短,极有可能出现假阴性;退火温度过低,可致非特异性PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物

菌液pcr没有条带的原因分析

如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genome DNA 做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增. 您可能感兴趣的(1)可重新以菌落和菌液为模板进行PCR对照检测,因为菌落PCR的假阳性概率还是比较高。如果仍出现上述结果,推测可能是平板上连接液中的未连接载体的扩增引起的目

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