扩增曲线不成S型,S型曲线的斜率

扩增曲线不成S型,S型曲线的斜率

扩增曲线的横坐标代表扩增循环系数(Cycle),纵坐标代表荧光强度。正常的扩增曲线是比较平滑的S型曲线。典型的扩增曲线分为基线期、指数增长期、线性增长期、平台期四个阶段。基线(ba显示方式有对数显示和线性显示。

曲线无典型“s”型扩增，呈现为斜直上飘的特点。0 2 原因分析：该类型曲线反应孔多数会出现液面偏低情况，可能是扩增试剂分液不准确，或反应孔气密性差，反应过程曲线无典型“S”型扩增，呈现为斜直上飘的特点。02 原因分析：该类型曲线反应孔多数会出现液面偏低情况，可能是扩增试剂分液不准确，或反应孔气密性差，反应过程中溶液蒸发引起探针浓

【类型一】某标本内标无S型扩增曲线。【类型二】外源性内标呈离散型曲线。原因分析：a) 标本采样欠佳，没有刮取到足够的鼻咽部细胞。b) 标本保存不当，核酸降解。c) 标本加错位置PCR理论的标准曲线应该是2的N次方。如图蓝线，但实际上，因为酶活力，dNTP，引物等的消耗，达不到理论的值，而是S曲

1. 扩增曲线未呈现典型的“S”型结果：扩增曲线出现非典型的“S”型，但熔解曲线正常。可能原因：RNA中有较多的PT-qPCR抑制物，造成了严重的抑制作用。建议：重新提取RNA,并进行纯度扩增曲线不是标准的S型可能是样本不纯，比如残留的抑制物造成的，建议通过Nanodrop测定OD260/280检测样本的纯度，也可以通过制作标准曲线确认样本质量，必要时重新制备样本。扩增曲线

扩增曲线没问题。你看一下Y轴坐标就知道了，是对数坐标，当然不是S型啦。7300我也没用过，应该有查看如果排除以上原因还是出现熔解曲线多峰的情况，就要考虑及时更换试剂盒，避免耽误实验进度。三、扩增曲线形状异常，如“S”型曲线反应体系引起的扩增曲线不光滑-