qpcr阴性对照会有ct值吗,PCR扩增过程中CT值的说法

qpcr阴性对照会有ct值吗,PCR扩增过程中CT值的说法

西柚果霸发布于2022-07-10 05:18来自Android 客户端IP湖北回复点赞收藏更多另外，也有可能是qPCR扩增效率低或者没有扩增，体系里边只有引物纠缠成的二聚体了。总之，产物长度建议

如果阴性对照没有Ct，或者Ct＞35，说明可能有表达了，而阴性对照的Ct如果接近30，那么肯定没有表达。具阴性对照33可以的，通常阴性对照CT值要么没有要么大于30,楼主可以去了解一下CT值的意义橙子昨天测细菌的PCR, 阴性对照直接降到28了赞回应Faust. 2022-08-

●＾● 当阳性对照Ct值≤28.0且出现典型扩增曲线，阴性对照无Ct值无扩增曲线时，实验成立，实例参考附录E。当被检样品出现典型的扩增曲线且Ct值≤38.0时，判为非洲猪瘟病毒核酸阳性；被检样品无最初，使用嵌入式染料进行实时荧光PCR (qPCR) 产物定量。但这些染料存在重大缺点，即会同时检测特异性以及非特异性PCR产物的扩增量。TaqMan方法的开发通过引入基于Taq DNA聚合酶5

(2)Ct值>30,重复性差。这种情况符合松柏分布，即在有效模板很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的Ct值差异较大。在出现这种情况时，我们RT-qPCR实验中，大家或多或少会遇到扩增曲线异常、熔解曲线异常和重复性不好的问题，可从以下几个方面对症分析。正常的扩增曲线一般呈S型，Ct值最好在20-30之间。异常的扩增曲线包括

图一二是同个孔的扩增曲线，我原液1ulcdna(10ul体系)没有ct值……而且扩增曲线怪怪的图三是5倍稀释后ct值有11,可是我不信有这么高……因为我跑蛋白跑不出来…图四是我没有加cdna的7、如果靶序列发生突变或缺失时，也会影响引物和模板的特异性结合，产生假阴性结果。Q3:非特异性条带扩增或者条带出现拖尾现象Answer: 1、当引物特异性差或引物形成二聚体时，可重新