pcr内参ct值很高,荧光定量ct值超过30怎么办

荧光定量内参高 2023-06-10 15:20 892 墨鱼

荧光定量内参高

pcr内参ct值很高,荧光定量ct值超过30怎么办

Ct值与模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始模板浓度越高，Ct值越小；起始模板量浓度越低，Ct值越大。这就是荧光定量PCR的理论基础。2、阈值怎么确定呢？阈值(threshold)一般是基通常酶的扩增效率无法达到100%,达到1个拷贝模板的循环数可能会达到38或更高，如下图我用qPCR和数字PCR测到了1拷贝模板对应的Ct值为37.91。当酶的效率更低或者存在抑制剂时，检测到1拷

⊙▂⊙ 求助，pcr新手一枚，小鼠来源和人来源的gapdh的ct值都30+,关键是跟师姐用的一样的引物，师姐的ct值15左右#科研#实验#pcr 2022-09-19 共10+ 条评论登录查看更多评论立即登录10+10+10大概30左右，有个别内参ct值能达到35，请问这种情况该如何处理？我之前跑的定量内参在17-20左右，目的

＞▂＜首页发现业务合作创作者服务新闻中心关于我们社会责任加入我们中文油炸实验室关注RT-pcr内参ct值很高…real time RT-PCR,重复多次，测了模板cDNA 浓度2000ng/ml,纯度按我们私底下交流的说法，CT值越高表达量越低，引物是不可能改了，我们做之前cDNA会稀释十倍，但是当

因为你的PCR反应体系已经在别的样本上得到证实，因此造成Ct值高的直接原因就是，模板量低。导致模板量低体系中的水全部用模板替代。提取RNA时候注意在冰上进行免得降解现在血清里内参好像没统一标准，我用GAPDH,β-actin效果都不太好；另外，我做的血清提RNA，浓度不

刚接触pcr不久跑的细胞，用gapdh做的内参，结果内参ct值在26左右且略高于目的基因，正常来说应该是20左右才对。有的说可能是cdna没稀释导致的(因为cdna里有很多较高的持家基因，亮，你提供PCR的文件非常好，比如说做组织表达，如严重的DNA污染等。这个要看你在做PCR前的加样量是否一致。CT值只能在同样的基因之间比较。美国

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