pcr引物浓度,引物工作浓度

pcr引物浓度,引物工作浓度

PCR引物浓度一般选5～20μmol/L。PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和2.引物浓度引物的浓度会影响特异性。最佳的引物浓度一般在0.1到0.5μM。较高的引物浓度会导致非特异性产物扩增。3.引物退火温度引物的另一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%

不管多少体积，反应终浓度不变就行了，一般引物终浓度在10uM左右。另外，不建议反应体系太大，一般是205、引物浓度：每条引物浓度0.1-1umol或10-100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物间二聚体的形成机会。Q6:克隆PCR产物的最

在PCR反应中，引物的使用浓度通常在0.1-1.0 μM之间。如果引物使用浓度过低，PCR反应的特异性和灵敏度都会受到影响，反应产物的数量也会受到限制。而如果引物使用浓度过高，会导PCR引物浓度一般选5～20μmol/L。PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要

ˇ△ˇ 加水量，引物的作用是帮助游离的，PCR引物浓度一般选5~20μmol/PCR,一般都稀释成应用液，dN模板和缓冲液，25μl体系，由PCR在实验中的目的决定，会将引物统一稀释到一PCR反应引物浓度多少合适储备液一般是100uM,也有稀释成10uM的。反正做PCR的最终其工作液终浓度范围是0.2μmol/L左右。我一般把引物稀释成10uM,25微升PCR体系

4. 引物的浓度引物浓度太低，会致使反应不完全，若引物太多，则发生错配以及产生非特异的产物的可能性会大大增加。对于大多数PCR 反应，0. 5μM 是个合适的浓度，我把引物浓度稀释到10μmol/L,然后在50μL反应体系中加入1μL该浓度的引物，这样算来，在该次PCR反应中引物的终浓度是0.2μmol/L(200000pmol/L)。该浓度行吗？我