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荧光定量pcr阈值设定原则 |
荧光pcr检测原理,荧光pcr技术的原理
荧光定量PCR 原理荧光定量PCR 最早称TaqMan PCR ,后来也叫Real-Time PCR ,是美国PE ( Perkin Elmer )公司1995 年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技(1)扩增曲线(amplification curve): 是在实时荧光定量PCR中监测到的荧光信号随着循环数变化而绘制的一条曲线。在进行PCR反应过程中,通过检测系统对PCR管内的样品进行实时检测,最后
荧光探针技术是基于荧光共振能量转移(FRET)原理建立的实时荧光定量PCR技术。所谓的FRET原理,就是当一个荧光基团与一个淬灭基团的距离接近到一定的范围,就会发生荧光能量的转移,淬灭2)荧光标记引物对引物进行荧光标记从而使荧光标记基团直接掺入PCR扩增产物. 3)荧光标记探针常规引物以外,引入荧光基团标记的特异性探针,探针可与模板发生一对一结合关系。a)
TaqMan试剂通过采用荧光探针在PCR循环过程中随着特定PCR产物的累计而对其进行检测。工作原理:步骤、过程构建一段寡核苷酸探针:5’端标记荧光染料报告基团,3’端标记淬灭染料基团。当探针保一、荧光定量PCR原理荧光定量PCR(Real-time PCR),是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。以
ˇ^ˇ 荧光PCR检测原理一、荧光信号的检测荧光标记信号的产生荧光标记基团在某波长的激发光刺激下,产生一个更长波长的发射光FRET?某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基《荧光PCR检测原理》由会员分享,可在线阅读,更多相关《荧光PCR检测原理(17页珍藏版)》请在人人文库网上搜索。1、一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测荧光标记信号的产生荧光标
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