溶解曲线没有峰,qpcr溶解曲线多峰

pcr没有溶解曲线的原因 2023-06-09 19:15 494 墨鱼

pcr没有溶解曲线的原因

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问题分析：PCR产物目的序列中GC含量不均一造成的同一产物解离稍有偏差造成，虽然扩增产物特异，但融解曲线出现非单一峰的现象。解决方法：电泳进行确认是否为大小正确的单一条带。24.有扩增曲线无溶解曲线可能是熔解程序设置错误，未搜集荧光信号，建议重新实验，增加熔解曲线阶段的信号搜集。5.熔解曲线峰型杂乱1)反应体系污染，结合NTC和NRC

曾遇过这种情况，熔解曲线没有峰，虽然有扩增曲线和ct，但数据不可靠，后检查原因是模板和引物问题，换(融解曲线呈单一峰时，表示无非特异性产物，荧光定量准确) 2:融解曲线的两种不同形式图二对图二曲线每一个位置求导，负导数(-dI/dT)作为纵坐标，得到图三：图三3:红色框位置曲

荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为：一般每加温一度，读一次信号，当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多，曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化，开始加热，信号变化不大，所以几乎是平的。当收藏回复点赞哟哟哟哟棨：是什么条件设置问题呀～三点点点回复@哟哟哟哟棨：可能是没收集荧光信号

qPCR 溶解曲线没有峰出现，前端较高，是什么原因可能是没有检测出来，你的Ct是不是很大了，比如30以后，或者扩增曲线不正常溶解曲线的峰代表：当温度高于扩增产物的TM值时，双链产物变单链，荧光值因为这样的变化而产生变化，根据这一原理，推算体系是是否会在温度变化时产生荧光值的变化

ˋ＾ˊ 基因1 的溶解曲线一般的主峰前面出峰的话，是引物二聚体，而如果主峰后面出峰的话，一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为：一般每加温一度，读一次信号，当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多，曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化，开始加

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