pcr产物比目的条带大的原因,pcr条带怎么分析

PCR扩增产物分析 2023-10-12 20:10 414 墨鱼

PCR扩增产物分析

pcr产物比目的条带大的原因,pcr条带怎么分析

比模板还要大，应该不是污染的问题，我来猜下可能的情况：1、有可能是酶量太大，你看到的是蛋白。2、我现在做多重扩增，经常出现这种比基因组还大的条带，但已排除了出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增时，扩增出的P

大很多吗？有时候电泳跑出来的带和MARKER对不上，但是送去测序的时候是没有问题的。要是你扩的很纯没杂带的话，干脆花几十块钱送去测序，反正现在测序也不贵。可能是电泳的时候参数没设置好，要是marker正常，则电泳过程应该没有问题。

∪﹏∪ xzl0831楼主还有我的Marker是2000的2011-11-10IP四川四川收藏回复点赞【求助】PCR产物电泳出现比目的条带大900bp的片段最近用primer5.0和oligo7.0设计了两个基因的引物，NCBI blast结果如图，目的片段都是200左右。普通pcr产物电泳结果，一个电泳

若扩增产物条带大小与目的条带一致，说明有污染。更换新的Mix、水或引物重复实验。反应体系在超净工作台就看扩增的模板是什么，是不是中间有内含子序列，重新核查从正向引物到反向引物的大小。如果这些都检查了没问题，可以考虑把产物测序，通过序列比对找出原因。

1、引物带。引物浓度过高或是扩增效率不是特别高时都会有，一般不呈现为细带，为发散状；如果目的扩增产物带和引物带都很亮，可以考虑适当降低引物量。2、引物二聚体带。比引物PCR反应扩增产物出现多条带原因：(1)引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。2)循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。3)酶的用

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