溶解曲线不在一个峰怎么办,qPCR溶解曲线分析

溶解曲线出现多峰 2023-10-15 16:50 508 墨鱼

溶解曲线出现多峰

溶解曲线不在一个峰怎么办,qPCR溶解曲线分析

5、溶解曲线不止一个主峰引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓不好意思，刚才看错了，同一引物所用样品溶解曲线的峰是应该在同一温度的位置，我看了下自己real-time的溶解曲线，也是这样子的，只有偶然的一个样品峰的位置不对，具体原因我也不

荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为：一般每加温一度，读一次信号，当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多，曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化，开始加可利用高分辨率琼脂糖电泳确认或重复实验。4.有扩增曲线无溶解曲线可能是熔解程序设置错误，未搜集荧光信号，建议重新实验，增加熔解曲线阶段的信号搜集。5.熔解曲线峰型杂乱1)反应

为什么峰不在一个时间点上？有没有大神帮我看一下，可能是什么原因造成的。这样的溶解曲线，产生的数据如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和镁离子浓度来解决，但如果次峰强于主峰，就是说杂带的特异性高于目的条带，一般的只能换引物了。不过从你的图上看主峰

溶解曲线形状异常(1)杂峰在主峰之前，Tm 约为70 - 75℃——一般为引物二聚体这种情况主要有三个解决方法：重新设计引物；杂峰为引物二聚体，引物二聚体主要是由于体系内引物与引物之前预实验目的基因和内参基因的溶解曲线都很好，今天做大量样本的时候目的基因溶解曲线出现了双峰，减少了引物浓度，结果没有改善，请问大佬们可能是什么原因，有可能是模板量太小扩增不好ct值太大吗，

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标签： qPCR溶解曲线分析