pcr扩增曲线不起跳,正常qpcr扩增曲线

pcr扩增曲线不起跳,正常qpcr扩增曲线

使DNA得以扩增。其目的是检测核酸的表达，主要是RNA的表达，DNA不需要反转录的过程，直接PCR检测即可。1.1 使用普通PCR仪器所用耗材普通耗材一般透光度比较差，会造成荧光扩增曲线异常，比如打折的扩增曲线。

＋△＋ 三.扩增曲线末尾起跳，但没有完整扩增1. 可能存在污染：建议对样本进行复检。2. 如果是阴性对照，可能是引物二聚体或污染导致；如果是正常样本，说明浓度过低或者加样量不足。四.复孔耗材对于荧光定量PCR来说比较重要，很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的。常见的耗材相关问题包括：1)错误使用成普通PCR仪器所对应的耗材普通PCR耗材一般透光度比较

⊙﹏⊙‖∣° 扩增曲线不稳定可能原因：RNA 纯度低；体系中存在较多杂质；仪器使用时间过长。解决方案：提取高纯度的RNA,小心操作；对仪器进行校准；- 扩增无法达到平台期可能原因：模板浓度太PCR正常扩增曲线随着实验的进⾏，扩增产物不断累积，相应的荧光信号也不断在增加，每进⾏⼀个循环就采集⼀次荧光的信号，经过⼀定的循环数后（⽐如40个循环），就可以得到下

具体过程我不是非常清楚，请高手指正。6. 荧光定量PCR的基线，是怎么确定的呢？基线就是背景值，因此就是曲线在没有“起跳”之前的一段。在软件上有一个地方可末尾起跳可能有较多因素，包括：1)存在污染；2)非特异性扩增；3)样本浓度低；4)酶特异性差，可以进行逐一排查。5. 无扩增曲线或无Ct值作为最常见的情况，如下图所示，可能原因包括：1)PCR

PCR实验结果中有曲线出现末尾起跳但是没有完整扩增的现象。原因分析：(1)阴参曲线末尾起跳，通常表示存在污染；(2)复检样本，排除非特异性扩增的可能性；(3)正常样本也可存在曲线末PCR实验的工作流程是：标本采集→ 标本运输→标本处理→核酸提取→ 反转录(RNA 病毒)→扩增→ 结果读取。PCR扩增曲线扩增曲线的横坐标代表扩增循环系数(Cycle),纵坐标代表荧光