影响pcr结果的因素有哪些,影响pcr反应效率的因素有哪些

dna浓度高会影响pcr吗 2023-10-05 19:06 980 墨鱼

dna浓度高会影响pcr吗

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1.模板变性温度变性温度是决定PCR反应中双链DNA解链的温度，达不到变性温度就不会产生单链DNA模板，PCR也就不会启动。变性温度低则变性不完全，DNA双链会很快复性，7. 平台效应和PCR循环的次数在PCR基因扩增的后期，由于产物的堆积，将使原来产物以指数增加的速度变为平坦曲线，即所谓平台效应。它的出现是由于PCR原料的不断消耗、酶的稳定性

↓。υ。↓ 1、PCR反应的影响因素变性温度与时间：模板变性温度是决定PCR反应中双链DNA解链的温度，达不到变性温度就不会产生单链DNA模板，PCR也就不会启动。变性温度低则变性不完全，DNA双链会很引物，是进行PCR 实验的必备条件。其特异性的问题可通过「BLAST」搞定，让人比较头痛的是引物可以形成「发夹结构」或「二聚体」即在<75℃ 时出现溶解曲线的峰),影响扩增效率，最终导

模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响PCR效率；模板量，过高的模板量反而会降低pcr效率和特异性；引物，引物的长度需要再效率和特异性间获得优化，其次要控制引物GC含如敏感性很高，要注意操作和试剂污染问题；整个反应微量，要求操作很精细，取样量很少，吸头多沾一点可能改变整个反应体系成分比例，从而影响PCR扩增的准确性。根据

影响pcr反应的因素有哪些1.模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响pcr效率；2.模板量，过高的模板量反而会降低pcr效率和特异性；3.引物，引物的长度需影响PCR的主要因素有：1、温度循环参数；关于热循环时间的另一个重要考虑是两条引物之间的距离，距离越

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