pcr有目的条带但是很暗,pcr结果比目的条带短

pcr条带弱怎么优化 2023-10-14 11:23 438 墨鱼

pcr条带弱怎么优化

pcr有目的条带但是很暗,pcr结果比目的条带短

?０? PCR扩出来的条带亮度很弱是什么原因1. 模板的用量在你这种情况下应该和目的条带浓度关系不大——记得realtimePCR的原理图么，循环数够多时，目的片段的终浓度在同时，也可以修改你的循环次数，太多的循环次数也很可能扩增出非特异性条带。在pcr体系中适当加入甘油、

心态已崩，跑了三轮了什么都没有阳性对照也没有条带，什么都换了一遍还是没有条带同实验室的其他同学也出现了这种情况，但是还找不到原因有朋友能够提供一点改进思路吗？#PCR #研究原因可能有1.引物、模板没问题的话，就加cycle,多扩几轮，就亮了.(一般pcr酶和buffer是没有问题的，除非你反复冻融或者长时间放置室温)2.如果多扩了几轮，退火温度也降低了，但是条带仍然

所以只要将与正常等位基因所不同的那个突变碱基安排在引物3'最末端，当用某一含突变序列的引物进行PCR时，如果得到特异条带，表明被测基因含有该种突变。没有特异扩增带出现，则表示没其次可以考虑排查的地方包括PCR体系的构建，例如您的模版是否放入水平过多或者过少？引物加入量是否合理？

≥﹏≤ 1我跑出来的PCR目的条带很清晰，但是marker很暗，每个加样孔都一样的暗如题，另外换了其它的maker也是很暗，但是同样的maker别人跑出来的条带就很亮，我想请问是不是我样本的问题，PCR目前已成为不同样本间进行基因表达水平差异比较权威的方法。然而不适当的实验设计，没有足够的对照和重复，低质量的RNA样本，逆转录引物选择不理想，qRT-PCR的引物退火温度选择不

＋▂＋说明扩增不好。有以下几点建议可供参考：（1）适当提高循环数；（2）优化PCR反应程序；（3）提高模板质量；（4）选择扩增效率更好的引物。PCR条带不够亮，说明扩增效率不高.一方面可能是你的引物设计的不够好，导致扩增效率低；二是引物的退火温度，你可以做个温度梯度PCR摸索下最佳退火温度，这样可以提高

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