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多聚酶链式反应(polymerase chain reaction)简称PCR技术,是一种在DNA聚合酶作用下体外扩增特异DNA片段的技术。PCR技术操作简便,可在短时间获得数百万个特异的目的DNA序列dna聚合酶的特点: 1]以脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)为前体催化合成DNA; 2]需要模板和引物的存在; 3]不能起始合成新的DNA链; 4]催化dNTP加到⽣长中的DNA链的3-OH
╯ω╰ 聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的核苷酸片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊核苷酸复制,PCR的最大特点是能将微量的核苷酸进行大幅扩增PCR技术以其自身巧妙的原理有与众不同的特点,高特异性、高敏感性及简便快捷使其成为基因诊断首选的技术之一。一、高特异性,PCR扩增严格遵守碱基配对原则的半保留复制。半保
简便、快速PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大
aqDNA聚合酶是Mg2+依赖性酶,该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感.以活性程度很低的鲑鱼精子DNA为模板,dNTP的浓度为0.7~0.8mmol/L时,用不同浓度Mg2+进行PCR反加Taq DNA聚合酶和核苷酸可在末端加A。E. 高度重复序列可能会不稳定,在扩增中产生缺失和重排,如发现插入片段高频率地产生缺失和重排,需用重组缺陷大肠杆菌菌株。PCR反应特点特异性强PCR反应的
5、UDG酶——高效控制PCR残余污染尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶),这种酶也称为尿嘧啶-N- 糖基化酶或UNG酶。因PCR是一种极敏感的扩增技术,易受污染的影响。小量的PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-
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