PCR实验CT值偏高的原因,pcr的ct值太大

PCR实验CT值偏高的原因,pcr的ct值太大

有几个可能性。1、最有可能是RNA降解严重，按你的ct值来看，可能10%的RNA都降解了。建议电泳看看RNA原因：在模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性而直接导致复孔之间的Ct值差异较大。解决方法：如果溶解曲线呈单峰，且NTC与目的基因孔的Ct差异在3 以

一般Ct值越高，代表循环次数越多，体内新型冠状病毒的数量越少，而Ct值越低，说明循环次数越少，样本中新型冠状病毒核酸含量越多。临床上正常新型冠状病毒核酸检测Ct值为≥35,判断求助，pcr新手一枚，小鼠来源和人来源的gapdh的ct值都30+,关键是跟师姐用的一样的引物，师姐的ct值15左右#科研#实验#pcr 2022-09-19 共10+ 条评论登录查看更多评论立即登录10+10+10

这个时候系统会默认所有孔参与荧光定量PCR实验。导致CT值错误。如果我们把无样品C-H行数的target和sample前面的“√”清除后重新分析计算，就会得到正常的荧光如果你的样品的实验室器皿格式与用于PCR扩增的容器不匹配，为了将DNA模板添加到Master mix等分中，可调节

看看内参是否扩增正常，若它的CT值相对其他核酸样本很大，那可能是核酸加入量少，或是核酸中有抑制剂；若是有外参基因(一般用来监控核酸提取过程、以及PCR反应扩增是否正常),若扩增正常模板质量或者扩增效率的差异会造成Ct值偏大或过小。4.Ct值过大或过小小翌威逼利诱了我公司技术部的牛牛们，总结出Ct值常见的两类问题的原因和解决方法，以飨读者。

PCR扩增效率与CT 值也是成反比关系，扩增效率高则CT值小，扩增效率低则需要要用到的循环数增加所对应的CT值也会偏高。另外，合理的引物设计，防污染试剂的应用也会影响到CT值的大小。那么，Ct值过高的原因是什么呢？1. 样品质量不佳样品质量是影响荧光定量PCR实验结果的重要因素之一。如果样品中存在大量的DNA降解产物、RNA酶、抑制物等，会影响PCR反应的进行