用pcr产物做模板可以吗,不能作为pcr模板的

pcr时如何获得模板 2024-01-07 22:12 868 墨鱼

pcr时如何获得模板

用pcr产物做模板可以吗,不能作为pcr模板的

其次可以考虑排查的地方包括PCR体系的构建，例如您的模版是否放入水平过多或者过少？引物加入量是否合理？2. PCR 产物模板可直接使用PCR 扩增后反应产物(包含T7启动子序列和转录片段) 做模板，但建议

10.以上次的pcr产物作模板二次pcr,可以提高引物与模板的特异性，减少引物二聚体，如果两次时间间隔短的话，可以把原产物稀释100-1000倍，如果间隔较长可以稀释50 -100倍。pcR假② 对目的基因做标准曲线，一般用克隆该基因的质粒做梯度稀释，或用PCR 产物做梯度稀释，然后做定量扩增，通过曲线评估反应效率。绝对定量有效的扩增效率在90%-110%; ③ 重新纯化模板，

pcr产物做模板篇一：PCR反应模板的制备PCR反应模板的制备PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计，酶的质量.模板的制备，在前二者都稳定可行的情况下，PCR模板的制备尤答：对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的，而彩色透明的PCR管更有助于进行样品分类管理哦。但qPCR更推荐选用优质的白色PCR耗材。由于qPCR需要实时定量检测荧光信

2)PCR产物是否需要用凝胶纯化？如凝胶分析扩增产物只有一条带，不需要用凝胶纯化。如可见其他杂带，可能是积累了大量引物的二聚体。少量的引物二聚体的摩尔数也一般不建议这样做。除非你做巢式PCR。以PCR产物作为模板，首先必须保证你的PCR产物经过纯化，成分单一，因此，无论怎样，diyi轮PCR产物都要进行纯化，并且必须使用

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