PCR有扩增曲线没有Ct值,定量pcr扩增曲线锯齿状

荧光定量pcr扩增曲线 2023-06-04 12:04 529 墨鱼

荧光定量pcr扩增曲线

PCR有扩增曲线没有Ct值,定量pcr扩增曲线锯齿状

∩▽∩ 每个模板的ct值与该模板的起始的拷贝数的对数是存在线性关系的，起始的拷贝数越大，ct值就越小。标准品按照一定的倍数稀释5-6个浓度左右，根据rt-pcr的反应条件进行反应。以标准品拷28.本发明所述的确定pcr扩增曲线ct值的方法，包括pcr扩增曲线中断崖、突变点、波动点较少时确定ct值的方法，以及pcr扩增曲线中断崖、突变点、波动点较多时确定ct

将Baseline End设置为“扩增信号出现的前一个循环”即，图片展原始为26,将其设置为20,点击OK即可恢复正常曲线。异常曲线3:荧光定量PCR实验结果中无Ct值出现原因分析：(1)PCR参数设imoy007：求问先加rna会导致没有ct值吗园子678回复@imoy007：我先加的CDNA.，有CT值

1. 没有加模板或者浓度太低；

2. 引物在模板上没有结合位点；

3. 忘记加酶；

4. 没有加燃料或者一、PCR检测没有CT值的原因1、循环数不够(一般不超过45循环，不仅背景值提高，定量也不准); 2、PCR程序设置错误，检测荧光信号的步骤有误。一般SG法采用72℃延伸

⊙﹏⊙‖∣° PCR扩增效率与CT 值也是成反比关系，扩增效率高则CT值小，扩增效率低则需要要用到的循环数增加所对应的CT值也会偏高。另外，合理的引物设计，防污染试剂的应用也会影响到CT值的大小。没有加模板或者浓度太低；引物在模板上没有结合位点；忘记加酶；没有加燃料或者探针。或者探针设计有问题

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