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qpcr可以重新跑吗 |
qpcr需要跑多久,rna降解了还可以跑qpcr嘛
ddH2O将反转录后的cDNA稀释到2.5 ng/ul,-80℃保存。3Qpcr(48孔板) 内参:Gapdh,引物设计通过NCBI数据库(Gene-家鼠…体系:5ulSYBR,0.4ul前后引物,2ulcDNA ,RNase free water补足到1原则上可以,实验室里的同事经常混好了放冰箱对仪器进行一个大致验证,但是如果做定量(相对、绝对)的
样本污染的情况比较好检查,如果好奇有没有、是什么的话,qPCR的产物其实还能拿去跑胶的,看看有没有杂马上就开始的话,需要2-3个小时就可以了。不过一般PCR一次可以做几十上百个样,所以如果要等着凑一批的话就不好说了。
˙ω˙ 1. 实验仪器:移液枪、qPCR 仪要定期校准(较准周期一般是1 年),保证仪器准确性。2. 引物:引物设计后进行有效性验证,选取扩增效率在90%~110% 之间,且融解曲线单峰的引物,保证其找到原因@一下我,好奇塞尔诶木(作者) : 问了技术,说是我没混匀+有气泡的原因澜本嫁衣_52 03-11 回复我跑了四五年的qPCR第一次见这么曲里拐弯的曲线塞尔诶木(作者) : 和我科研路
PCR产品,跑琼脂糖胶一般跑30-50分钟已经足够,当然如果你的时间充裕的跑上3-4个小时也是没问题的,前提是样品不要跑出胶外。阅读全文荧光定量PCR体系如何加样?PCR反应体系还有一种电泳则是cDNA电泳,那是半定量必须要做的一步,但对于QPCR来说,做了无非是锦上添花,不做
需要注意什么呢…感觉经常出现1.8以下的比值科研狗小周周(作者) : 1.8的也可以用哒,跑出来结果也挺好的Dr. 良月十一: 我的经验是:我认为260/230比值略低于1.8对做qPCR没有影响(还有一种电泳则是cDNA电泳,那是半定量必须要做的一步,但对于QPCR来说,做了无非是锦上添花,不做也无可厚非.甚至有时候就是浪费时间而已. 分析总结。还有一种电泳则是cdna电泳
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标签: rna降解了还可以跑qpcr嘛
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