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PCR扩增程序 |
pcr扩增过程图解,PCR扩增环状DNA图解
方法/步骤1 我们要知道其基本原理是PCR技术的基本原理和DNA的天然复制过程基本是一样的,其靶序列两端互补的寡核苷酸引物与其特异性依赖于与DNA的半保留复制是生物进化和传代的重7272左右左右pcrpcr过程过程( (二二) ) pcrpcr的反应过程的反应过程变性变性-复性复性-延伸延伸多重循环多重循环(n)模板以模板以2en扩增扩增短片段以指数式扩增短片段以指数式扩增
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是___。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是___。上述两个解链过程的1 PCR过程图1 PCR原理示意图(图片来源于网络) 变性-退火-延伸(图1)。2 过程细节PCR中DNA的合成过程均以两个引物特异性结合处为起点。引物通常是分别取自靶DNA序列两条链的3’端
图1 聚合酶链式反应(PCR)技术原理示意图PCR时,只要在试管内加入模板DNA、引物、dNTP及缓冲液(酶催化反应的缓冲液)DNA聚合酶就能在数小时内将目标序列扩增100万倍以上。模步骤②:引物与单链DNA 退火;步骤③:引物在DNA 聚合酶的存在下延伸,与单链DNA 形成互补链。一般将步骤①②③称为一个循环,每次进行DNA 扩增时以此循环25-35 次。进行PCR 扩
PCR技术实际上是在模板DNA、引物以及原料(四种脱氧核糖核苷酸)在适宜的反应条件下,通过DNA聚合酶的酶促反应完成DNA扩增的过程。PCR技术的特异性取决于引物和模PCR基本原理示意图氢键5’3’3’5’待扩增目的DNA片段(红色区域)第1页/共11页5’3’加热变性5’3’加热变性后氢键被破坏,模板分成两条单链。第2页/共11页3’5’3’5
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