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09-25 118
如何看pcr条带 |
PCR阳性对照无条带,基因组未降解但没有条带
pcr阳性对照不出条带的原因阳性对照不出的原因很多,主要考虑试剂系统。包括Taq酶活性、引物设计、Mg离子含量、dNTP浓度。还可考虑模板DNA的提取方法,甚至你的PCR阳性通常是指丙肝病毒RNA阳性,说明患者已经感染丙肝病毒。丙肝病毒RNA是丙肝病毒的核糖核酸,丙肝病毒感染后,在血液中会以比较快的速度复制丙肝病毒RNA,并且在肝细胞中大
只能说实验失败了,阳性对照没有扩增出来或者跑胶过程中逸散掉了。具体原因只能去逐步排查了。孔附近的PCR电泳无条带可能的原因及对应的解决方案如下:1、酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA 聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。2
(=`′=) 阳性对照、待测样本均无条带。PCR反应体系或反应条件不合适。使用梯度PCR摸索PCR反应条件。PCR试剂保存不当失去活性。2× PCR Mix应保存于-20℃,使用时避免反复冻融。若使用频PCR扩增阳性对照有两条条带,另一条条带可能是外源基因做成的,阴性对照没有条带挺正常的,可能是因为退火温度不适合或循环次数不适合之类的,实验重新做一遍再看看吧
心态已崩,跑了三轮了什么都没有阳性对照也没有条带,什么都换了一遍还是没有条带同实验室的其他同学也出现了这种情况,但是还找不到原因有朋友能够提供一点改进思路吗?#PCR #研究现象:条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带原因:1.引物特异性差2.模板或引物浓度过高3.酶量过多4.Mg2+浓度偏高5.退火温度偏低6.循环次数过多对策
有帮助仅Marker有条带,可以说明琼脂糖凝胶过程没有问题。PCR没有条带可以从以下几点寻找原因:引物缺乏特异性、PCR体系配置、PCR循环等,建议做阳性对照以确保PCR体系和循环过调整退火温度,适当增加一点酶,结果或许会好一点。内参跑的出来说明RNA提取应该每问题,如果TEMPLATE 有的话(有阳性对照更能说明问题)那应该是PCR问题,PCR影响的东西很多,希望
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