pcr目的基因ct值大于30,qpcr ct值范围

pcr目的基因ct值大于30,qpcr ct值范围

RT-PCR中目的基因与内参基因的循环数都大于30,结果完全不可信吗？最佳答案二级知识专家青禾鹭草2021-01-31 09:29不会。做cDNA的时候样品少，经常会上30的。如一般做实验，大于30就要考虑是不是假阳性了03-16· 热评​171 HaloRanger 祖a人士ct值越高，样品中病毒得绝对拷贝数越低，不严谨地可近似认为ct值减少1.0拷贝数翻倍。实际需要考虑

1、阈值循环数(Cycle threshold,Ct值)的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。Ct值与模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始模板浓度越高，Ct值越小；起始目的基因CONT 目的基因32.84 32.71 33.59 33.23 32.70 32.68 做了好几次都是这种情况，请问这种情况是否是目的基因表达本来就过低？还是CT值过大根本不可信？回

＞△＜ 式中：X n 是PCR 经过n 个循环后目的基因的分子数；X 0 是目的基因的起始分子数；E X 是PCR 扩增效率；n 为循环数。CT 是目的基因达到阈值时所经历的循环数，因此：X T  X 0  1  E X dPCR是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,dPCR对结果的判定不依赖于扩增曲线循环Ct值，不受扩增效率的影响，能够直接读出DNA的分子个数，能够对起始样本核酸分子绝对定量。分割单

↓。υ。↓ 在qPCR(定量PCR) 反应时，cDNA 和gDNA 可能会被同时扩增，定量仪器无法区分荧光信号是来自cDNA 还是gDNA,因此结果可能会存在偏差。特别是低表达量的基因，本身的扩增信号低，CT 值不会。做cDNA的时候样品少，经常会上30的。如果你做了复孔，重复样的Ct值一样就可以。如果你做了梯度，Ct值呈线性的话，就可以，如果是乱七八糟的，就不行了。内参基

【Ct值的含义】刚说了，PCR就是让样本中病毒的核酸翻倍，Ct就是用来表达具体翻了多少倍的一个数值💡例如：如果PCR检测中Ct为40,那就代表将样本中病毒核酸翻倍至2的40次方倍来进行检测CT值越小；也就是说CT值代表标本内病毒的含量，可作为新冠核酸检测阴性和阳性的判断标准；被测样本中目的基因(如新冠核酸)浓度越高，则荧光信号到达设定的域值时所