内参ct值高于目的基因,qpcr内参ct值大于20

内参ct值高于目的基因,qpcr内参ct值大于20

比较Ct指的是通过与内参基因Ct值之间的相差来计算基因表达差异，也称之是2-△△Ct。3.1 绝对定量3.2 2-△△Ct定量3.3 其他定量方法六、Real-Time qPCR常见问题分析1.无Ct值出现看似简单的基因表达量差异验证，当遇到低丰富表达的基因时，也许就举步维艰。模板获取困难导致的RNA提取量少或RNA质量不佳，即使选用最佳的试剂、筛选出最良好的引物，也有可能qPCR定量

阿威360 楼主赞过没有规定说目的基因一定要大于内参基因，内参基因只能说是稳定表达2020-03-04IP未知进行相对基因表达分析普遍采用操作简便的2-ΔΔCT法，此方法的应用基础是目标基因和参照基因的扩增效率都接近100%并且相互间效率偏差在5%以内。所有实验组(Test)和对照组(Control)均

不同基因之间表达量差异很大，可达上千甚至上万倍之差，所以CT值差10以内属正常现象，但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因，如果目标基因和内存基因表达不同处理下内参基因ct值不同能说明什么问题？。实践中的问题实时定量PCR已广泛地运用于分子生物学的各个领域，就目前的应用情况来看，虽然取得了很好的效果，但是

按我们私底下交流的说法，CT值越高表达量越低，引物是不可能改了，我们做之前cDNA会稀释十倍，但是当内参基因的ct值范围通常较稳定，一般在15至25之间。通过比较目的基因和内参基因的ct值差异，可以计算出目的基因的相对表达量，从而得到更加客观的结果。三、目的基因的ct值范围

S1=目的基因的ct值—内参基因的ct mean值。3⃣️ 然后进行Power函数的计算。2−ΔCt=Power(2,-S1)Power函数就是在表格的插入函数那里，然后可以搜索power就能找到，函数参数设置如图4刚接触pcr不久跑的细胞，用gapdh做的内参，结果内参ct值在26左右且略高于目的基因，正常来说应该是20左右才对。有的说可能是cdna没稀释导致的(因为cdna里有很多