taqman探针荧光定量pcr原理,TaqMan探针法qPCR原理

荧光pcr的基本原理 2023-10-12 17:25 691 墨鱼

荧光pcr的基本原理

taqman探针荧光定量pcr原理,TaqMan探针法qPCR原理

荧光定量PCR 最早称TaqMan PCR ,后来也叫Real-Time PCR ,是美国PE ( Perkin Elmer )公司1995 年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR 基础上加入荧光标记探针或如果我们把PCR终点的判断信号固定成一个统一的值(即qPCR中的荧光阈值),那么循环数与起始浓度的对数就成了线性关系，这就是qPCR相对定量的基本原理。不过有两个因素：(1)人的肉眼无法

实时荧光定量PCR法可分别为SYBR Green l荧光染料法和Taqman探针法。我中心微生物检验所日常进行核酸检测就是运用Taqman探针法，新冠病毒核酸检测也是利用此项技术。该法高度特异，其TaqMan荧光定量PCR的基本原理是将特异性引物与探针(通常是一种双链DNA,其中一条链包含一种荧光探针)结合起来，构建特异性的反转录酶链反应体系，在体系中酶水解特异性引物，作用

o(╯□╰)o 过程原理解析pcr扩增时，将一对引物、特异性的taqman探针(5’端标记荧光报告基团，3’端标记荧光淬灭基团)与模板dna混合，开始时，探针完整地结合在dna任意一条单TaqMan探针法qPCR的原理是在PCR扩增时加入一对引物的同时另外加入一条特异性的TaqMan荧光探针，该探针与模板特异性地结合，其结合位点在两条引物之间。当探针完整时，报告荧光基团和淬灭荧光基团的

∪▽∪ 最近因为疫情升温，PCR的检测技术又一次受到关注。PCR的检测过程常使用荧光探针来做核酸产物的定量。荧光探针可分为非专一性与专一性两类，其中TaqMan探针就是专一性探针的代表。什么TaqMan 方法背景最初，使用嵌入式染料进行实时荧光PCR产物定量。但这些染料存在重大缺点，即会同时检测特异性以及非特异性PCR 产物的扩增量。TaqMan 方法的开发通过引入基于TaqD

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