pcr扩增2000bp的条件,pcr扩增的过程

pcr扩增检测采用内标 2022-12-03 05:26 194 墨鱼

pcr扩增检测采用内标

pcr扩增2000bp的条件,pcr扩增的过程

∪△∪ PCR扩增的反应条件：10×扩增缓冲液10ul；4种dNTP混合物各200umol/L；引物各10～100pmol；模板DNA 0.1～2ug；Taq用的酶不一样，那个延伸效率不一样。一般我用的2xTag酶效率是1000bp每分钟，可以试着延长延伸时间

2000bp的片段有点长啊，建议先扩这个片段的一部分，先解决有没有扩的问题，再解决能不能扩的问题。只要不形成典型的环，或者两条引物严重配对就可以了（50%以下就可以）最重要的是能扩增出来，别的考虑那

?＾? 一般红色为正极、黑色为负极，切记DNA 样品由负极往正极泳动(靠近加样孔的一端为负),电压为1-5V/cm(长度以两个电级之间的距离计算);根据指示剂泳动的位置，判断是否终止电泳，一般引物不特异，你可以换下引物的序列。

≥＾≤ 用的Pfu。pcr条件为95度30s, 63度30s 68度3min。这条片段中间包括一些重复序列，大概20多个bp左右(3)一般扩增的PCR产物长度可达2.0 kb,且特异性也较高。PCR的广泛应用得益于此酶，目前各试剂公司中开发了多种类型的Taq酶，有用于长片段扩增的酶，扩增长度极端可达40kb;有在常温条件下即可应用的常

pcr技术扩增dna需要的条件是目的基因、引物、四种脱氧核苷酸、DNA聚合酶等。PCR是利用DNA在体外摄氏95°1. PCR扩增(1)PCR扩增体系(2)PCR扩增条件注意：为了获得更高保真性的扩增产物，采用高浓度模板和少量PCR循环数组合的扩增方法。2.纯化片段(1)电泳检测：取10 μl PCR产物，根据片

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