核酸扩增曲线图阳性怎么看,新冠PCR的扩增曲线的意义及解读

核酸扩增曲线图阳性怎么看,新冠PCR的扩增曲线的意义及解读

配置试剂时注意检查试剂液面，核酸加样后用力压实封好反应板，上机扩增前再次检查有无缝隙。02 倒“S”型原始曲线图：基线调整后曲线图：01 曲线特点：曲线如倾倒的“S”型，呈现先最近几次扩增出现N基因非特性扩增曲线。1.期间提取试剂，扩增试剂均未更换2.每次非特性性扩增孔位置不固定3.第一列7.8是样本，第二列6.7.8是空白孔对照均出现这样的情况，最后一列是

⊙△⊙ 软件优化后扩增曲线向斜上方抬起，导致Ct减小，根据优化后扩增曲线会误判为阳性，但原始信号未有明显扩增。【原因分析】根据设定基线，软件在自动优化扩增曲线时会放大微小异常信号1、首先我们看一下PCR正常扩增曲线，是比较平滑的S型曲线，见下图：2、常见异常结果分析2.1 案例1 2.1.1现象：常见单基因翘尾且出现较大的Ct值和单基因翘尾无Ct值现象，见下图：2.1.2

一、通过实时荧光PCR扩增曲线评价【扩增曲线图解读】实时荧光PCR由于每个循环要监测荧光信号值，因此都有拟合好的扩增曲线，通过扩增曲线可以很直观、准确的了解和评判试剂质量4、扩增失败：漏分反应液、点错核酸列、选错扩增程序，加模板时吸到有磁珠造成干扰、酒精等消毒剂携带入孔等。异常图像：怪线状二内标污染特点：较为常见，表现为阴性对照、生理盐水

② 复检样本，如果复检后曲线为阴性直线则说明之前的末尾起跳为非特异性扩增，如果复检后曲线与之前一样末尾起跳则表示该样本中待检病毒核酸的浓度偏低；③ 更换试剂，建议使用不同厂解决方案：排除是否存在污染；排除污染原因后复检样本，如果复检后曲线为阴性直线则说明之前的末尾起跳为非特异性扩增，如果复检后曲线仍与之前一致则说明末尾起跳表示该样本中待检病毒核酸的浓度

(＊?↓˙＊) u 阳性判断标准：ORF1ab和N基因Ct值≤40,且有明显的S型扩增曲线u 阴性判断标准：ORF1ab和N基因无扩增曲线或Ct值>40,且内对照有扩增曲线u 可疑判断标准：ORF1ab和N区，仅有其中新型冠状病毒核酸如果报告是阴性，说明在呼吸道标本中没有发现新型冠状病毒，基本可以除外新型冠状病毒感染。如果报告呈阳性，