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切片后需要及时烤片吗 |
免疫组化烤片目的,免疫组化封闭的目的
2022.2.13-14 免疫组化法步骤(1)切片放入烤片盒,置于65℃恒温烤箱,熔蜡2h; (2)二甲苯1、二甲苯2、二甲苯3 脱蜡,各5min; (3)100%酒精、95%酒精、85%酒精、75%酒精水化,各5min; (4)P4.烤片60℃ 30分钟或37℃过夜,温度太高或时间太长,抗原容易丢失。5. 蜡块及切片的保存最好在4℃保存. 6. 脱片问题Poly-L-Lysine(多聚赖氨酸)为目前免疫组化染色工作中最
时间长短对免疫组化染色结果的影响不明显,在烤片温度提高到70-80℃时,烤片时间在3小时以内也同样无明显影响,但随着烤片温度提高,时间增加时会减弱,尤其在80℃的浸蜡温度且超不光免疫组化的片子要烤片,就是HE的片子切下来后也要烤片的。我想是为了使组织黏附在SEPC或者多聚赖氨酸包被的玻片上,防止掉片,至于HE的玻片,是为了脱蜡---我并没有请教病理
烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上,以免染色过程中切片脱落。切片在56~60℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的,但是,通常的烤片温度为;8~60℃,时间为2~6小时。由于高温干燥免疫组化实验过程包括切片制作(固定,脱水,透明,包埋,切片,贴片,烤片),脱蜡,水化,阻断,抗原修
当天做免疫组化可能需要60度4h左右,此时除充分脱蜡,还有使组织切片贴壁更加牢固,以免后续步骤中脱片烤片烤片的目的,一是方便脱蜡,二是将组织切片牢固地附贴于玻片上,以防止在整个染色过程中出现脱片情况,以及能让经烤片后的组织切片中的免疫反应活性能在常温
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