qpcrct值高说明什么,做qpcr的ct值30左右能不能用

qpcr的cq值是什么 2022-12-22 15:51 830 墨鱼

qpcr的cq值是什么

qpcrct值高说明什么,做qpcr的ct值30左右能不能用

起始模板量浓度越高，Ct值越小；起始模板量浓度越低，Ct值越大。2.扩增曲线、荧光阈值与一定产物量qPCR扩增产物量是以荧光信号的形式直接呈现，也就是扩增曲线。在PCR早期，扩OD260/OD280<1.9说明有蛋白污染；OD260/OD280=1.9—2.1说明纯度良好；OD260/OD280>2.1说明有部分降解。2、得率(OD260) Yeild=OD260x稀释倍数x40ng/ul 3、完整性完整的RNA电泳条

小妹最近做qPCR,在同一株细胞上提取过5次mRNA,进行了五六次qPCR,内参ACTB的Ct值都在28-31之间，目的基因在33-37之间，实验室用的是统一的方法，一般水的Ct值在35-36。做过正交实验，感觉浓度可以提一提。看260/280的比值是DNA居多，可以在洗脱前一步加DNAse I消化5min PS 我自己

ゃōゃ试剂：这是大家最容易被欺骗的地方，认为试剂好Ct值就比较低，因为只有这个指标是最直观的，以至于市面上的公司都在拼命的降低Ct值，有的公司甚至以增加预热，预反应的方式，让Taq酶启动起qPCR试剂的评价需要从分析敏感性(最低检测限),分析特异性(交叉反应),重复性(精密度),诊断敏感性，诊断特异性等多个指标去衡量(诊断试剂评价系列2-核酸检测方法(更正),诊断试剂评价

CT 值的表达公式为：扩增产物量=起始模板量×( 1+En)循环个数。通常QPCR实验中CT值的异常主要有以下几种情况：一、扩增曲线正常，CT值偏大或偏小从CT值表达公式中我们可以看出初始Ct 值比较靠后，对实验有一定的影响，因为经过那么多次的循环，酶的活性有可能有所下降，这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR 的理论基础就是每次循环的扩增效率

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