pcr溶解曲线两个峰,pcr溶解曲线多个峰

pcr溶解曲线tm值 2023-06-05 17:29 372 墨鱼

pcr溶解曲线tm值

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较低峰出现在右侧：问题分析：大片段的非特异性扩增解决方法：重新设计引物；双峰不明显：问题分析：PCR产物目的序列中GC含量不均一造成的同一产物解离稍有偏差造成，虽然扩增产物特异定量PCR数据的处理要求数据满足下面两个主要的条件：扩增曲线平滑，熔解曲线单一。例如：如果熔解曲线为双峰，表示为出现非特异性扩增，则其对应的数据不可用。当

不过看峰的位置，是非特异的扩增，与你的引物或者cDNA有关，你已经试过了多种退火温度都没有改善，不好意思，刚才看错了，同一引物所用样品溶解曲线的峰是应该在同一温度的位置，我看了下自己real-time的溶解曲线，也是这样子的，只有偶然的一个样品峰的位置不对，具体原因我也不

数据分析就是要基于溶解曲线单峰的情况下进行，否则Ct值都是虚的。电泳一般是指的定量PCR产物，可以看荧光定量PCR有双峰是什么原因？定量引物是NCBI上设计，特异性没问题，并且跑普通PCR条带特异也很好。跑定量时内参的溶解曲线峰没问题，重复性也好。就是自己的引物跑出了双峰，重

有双峰，说明引物的特异性不好。每个峰值代表一个扩增产物。建议优化引物我想请问一下离80多远就算远小于80 了？

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标签： pcr溶解曲线多个峰