pcr结果相反,pcr程序错了怎么办

RTPCR与免疫荧光结果不一致 2024-01-07 09:35 118 墨鱼

RTPCR与免疫荧光结果不一致

pcr结果相反,pcr程序错了怎么办

如果测序的结果与PCR相反，那么需要考虑两种实验方法的原理和限制。PCR是一种扩增特定DNA片段的方法，它需要使用引物来选择性地扩增目标DNA。如果引物设计不当或在反转录过程中或者PCR过程中都可能有抑制物，这些抑制物，比如Na离子，EDTA,SDS,酚，血红素，腐植酸等等，都会对qPCR结果产生影响。具体体现在扩增曲线里会是这样：实际上去除抑制剂也只能在抽提的过程

western blot 和RT-PCR一般结果趋势还是相一致的，当然如果存在着其他调解的情况，如转录后，或翻译后水平的，也不排除这种可能性。对于你的情况，主要还是得多相反，ROX™ 的荧光信号值在反应中是基本保持不变的。ROX™ 有什么用呢？其实，在qPCR 反应中有许多反应本身的物理因素会影响信号检测，从而造成孔间数据的差异。例如：PCR 反应板本

第一次体系是15，后面体系是20，对这方面知识确实比较欠缺，结果不好（或相反），找不到什么原因。实验结果却总是不尽如意，有可能是PCR塑料耗材微量的污染，或者是抑制剂的引入造成的实验干扰。还有一个

如果某个药物对酪氨酸激酶产生影响也可有多种结局，RT-PCR表达结果上调可能可能是促进转录，或抑制mRNA的降解，但又可能抑制翻译，或促进蛋白降解。因而需要采用不采样不规范导致未采集到病原体，或者未能按要求处理样本，可能导致PCR结果呈现假阴性。另外，PCR设备故障、试剂未按要求储存等导致试剂失效，也可能导致假阴性的出现。还有一种极

RT-PCR再次证实了该基因在某细胞中，转染前没有表达，转染后表达显著增高。可是对此结果进行western验证的western blot 和RT-PCR一般结果趋势还是相一致的，当然如果存在着其他调解的情况，如转录后，或翻译后水平的，也不排除这种可能

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