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08-05 207
pcr内参和目的CT值差不多 |
pcr目的基因比内参ct值低,u6基因 内参
内参在体内本来含量就高,高点没啥,但是还是建议在CT在10以上。染料法的话可以做复孔检测,探针法同理不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达
如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致。如果出入很大,说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了管家基因求助,内参基因(gapdh)CT值在15-18,目的基因的CT值比内参基因小大概14-16,这个引物还能用吗,还是怎么处理解决;cDNA已经稀释10倍;出入不大可以用。如果出入很大,说明你的样本的
Ct值:是指QPCR扩增过程中,扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时所对应的扩增循环数(cycle threshold);也可以理解为起始模板扩增达到一定产无量时所对应的循赞同野蛮公爵站友的话,把cDNA浓度稀释到15倍试试,我前两天做过一次PCR,第一次5倍稀释,结果如楼主所言,目的基因比内参循环数还小;第二次15倍稀释,结果内参cq值
ˇ^ˇ windfr楼主谢谢楼上的同志.那我继续做下去了:2006-09-07IP江苏江苏收藏回复点赞通常Ct值越低,说明不用扩增放大太多倍就可以检测到病毒RNA,所需循环次数也少,用的时间也短,此时机体内所含病毒量越多,一般Ct值<35时,说明新型冠状病毒感染,但通常属于无症状
˙ω˙ 实验小白,最近刚开始做RT-PCR,我的对照组内参Ct是26.49,目的基因是15.17,实验组内参是26.46,目的基因是21.23,计算出来的表达量为0.01求助各位大神有解决的办法有多种原因。如果根据经验目的基因的表达确实应该低于内参基因的话,常见的问题是模板异常,如严重的DNA污染等。但也不排除其他原因,如引物特异性等。
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标签: u6基因 内参
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