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qpcr内参ct值小于15 |
qpcr内参不齐怎么调整,内参ct值在13~15之间正常吗
建议:先测浓度,按浓度跑内参,然后按内参灰度调整上样量。ps:你的抗体很不好内参跑成俩带不好实验室科研之RT-qPCR常见问题及解决办法3 在RT-qPCR的实验过程中,大家或多或少都会遇到扩增曲线异常、熔解曲线异常、重复性差等问题祝大家科研顺利#笔记灵感
一般建议,阳性结果(科研)调整到15-30之间,阴性对照Ct>35,内参基因一般小于20,且样品间内参的Ct值差不超过1,表明内参基因表达量稳定,复孔Ct值标准偏差不超过0.5。因为这里的R值仅仅是每个待检样本与对应内参基因的比值差。那如何考虑这个问题呢?很简单,对上面推导得到的所有样本和control组的2^(-△Ct),均除以control组的2^(-△Ct),即可得到2^(
●0● elf0724 发布于2021-04-28 16:11IP辽宁有深度,解答了我的一部分疑问回复点赞收藏更多Cq的可接受范围跟仪器也有关系,但多数在18-30内为好。内参的Cq 范围18-22为好。若是25或以上,你
qPCR内参总是不齐dxy_61h9ph26楼主关注求求各位大神救救实验小白了!1.内参基因选用的是B-actin,我做的课题是应激相关的,看了相关的文章,在我做的几个器官里内参是可以使用GAPDH组内样品差异都很小,组间差异的在可接受范围内(1个多CT),结果计算的是相对表达量,所以不用哈。
3.选择一个适合自己实验的内参。我所知道的常见的内参有beta-tubulin, beta-actin, GAPDH。如果研究的基因与代谢相关,可能就不太适合选择GAPDH。不过也需要多试一试,内参是齐的就可1.内参不齐(个别cDNA的样本与其他cDNA的样本内参CT值差异在2个循环以上),可将CT值差异较大的cDNA做不同梯度的倍比稀释进行qPCR,选择CT值差异小于2个循环的cDNA稀释倍数进行实验。一
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