荧光pcr曲线平台期向下,荧光pcr扩增曲线怎么看

荧光pcr阴性样本翘尾 2023-10-16 10:49 396 墨鱼

荧光pcr阴性样本翘尾

荧光pcr曲线平台期向下,荧光pcr扩增曲线怎么看

qPCR扩增曲线一般分成四个阶段：基线期、指数期、线性期和平台期。那么每个阶段PCR产物量的变化都有什么区别呢？哪个阶段最重要呢？小编这就一一道来。基线期PCR起始时，刚开始前几原因分析：主要由于复孔之间的细小差距导致的平台期的荧光信号差异较大；模板多加或少加。解决方法：确保准确加样，复孔之间只要ΔCt<0.5 就具备良好的重复性。

平台期有一定下降但不明显，由于模板过多所致。不用考虑引物二聚体的问题，已经在基线以下，没有意义。实在不放心可跑胶看下，但估计没有问题。注意（2）扩增曲线断裂或下滑比较典型的曲线下滑如上图所示，主要原因是模板浓度太高了，在基线期内就

ˇωˇ 原因分析：自动基线问题。解决方案：手动设置基线。将Baseline End设置为“扩增信号出现的前一个循环”即，图片展原始为26,将其设置为20,点击OK即可恢复正常曲线。异常曲线3:荧光定结果：扩增曲线基线期下滑。可能原因：基线范围设置不当。建议：重新手动设置基线。3. 荧光信号采集异常结果：扩增曲线异常，呈现锯齿状(或有熔解曲线无扩增曲线)。可能原因：荧光

资料参考：临床检验医学、赛默飞生命科学服务平台、检验视界网等对于荧光定量PCR的结果的判断，最直观的判断就是看扩增曲线是否正常。很多老师会遇到异常扩增曲线的困扰，接下来我们dxy_5k1kwh2：但是平台期出现了明显的下滑现象，这个图不能放论文上呀阿卡零回复@dxy_5k1kwh2：是

╯＾╰ （2）扩增曲线断裂或下滑比较典型的曲线下滑如上图所示，主要原因是模板浓度太高了，在基线期内就起峰来看一个典型的例子(图1),这是一组6个梯度稀释的标准品，扩增曲线指数期之后是漫长的线性扩增期，直到循环结束也没有出现明显的平台期。这样的结果能否得到理想的标准曲线用于定量分

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