qpcr内参ct值大于20,pcr内参ct值小于15的意义

qpcr内参ct值大于20,pcr内参ct值小于15的意义

●△● 引物要么扩增效率不高。建议做个跑胶，或者提新鲜组织试一下，做个标准曲线看看扩增效率，要么换个内参朋友们，破案了，样品问题。重提新鲜肝脏组织的内参，稀释到100倍ct值都能在20以内，稀释10倍的ct值17

Ct值：是指QPCR扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时所对应的扩增循环数(cycle threshold);也可以理解为起始模板扩增达到一定产无量时所对应的循1.内参不齐(个别cDNA的样本与其他cDNA的样本内参CT值差异在2个循环以上),可将CT值差异较大的cDNA做不同梯度的倍比稀释进行qPCR,选择CT值差异小于2个循环的cDNA稀释倍数进行实验。一

CT值过高说明模板量太高，过低可能是模板量低或者背景过高，这两种情况都会导致结果不准确，一般内参ct值控制在16-18之间可以保证比较真实的结果2021-05-30 12:27 News WIKI 相一般建议，阳性结果(科研)调整到15-30之间，阴性对照Ct>35,内参基因一般小于20,且样品间内参的Ct值差不超过1,表明内参基因表达量稳定，复孔Ct值标准偏差不超过0.5。

感觉浓度可以提一提。看260/280的比值是DNA居多，可以在洗脱前一步加DNAse I消化5min PS 我自己该研究采用RT-qPCR技术对8个内参基因在5个发育时期、3种不同组织器官和4个不同温度处理下的表达情况进行检测，通过ΔCt法、GeNorm和NormFiner对单基因、双基因

来自：弗雷尔卓德之心2021-12-03 20:20:26 GAPDH的ct值比目的基因还高，在27、28左，目的基因是25、26左右来自豆瓣App 赞回应转发赞收藏只看楼主你的回应用qPCR进行定量，理论上可行，实际上很难获得准确的定量结果。二、关于qPCR中Ct值的几点思考1、Ct值能否直接换算成模板拷贝数？通过制作标准曲线(E:90%~110%,R^2≥0.99,斜率-3.58 ~