pcr溶解曲线没有峰,pcr溶解曲线两个峰

pcr溶解曲线 2023-06-05 21:25 608 墨鱼

pcr溶解曲线

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分析测试，百科网，pcr溶解曲线的峰值太低，坐标是温度，每个温度点一个.一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值(不是强度本身).一开始加热的时候，虽然荧光强度比较强，但是由于我用SYBR Green 法做相对定量PCR 检测两个目的基因得表达，但是用ABI7500 两步法扩增得到得溶解曲线都有双峰，并且将退火延伸温度从60 度提高到65 度重新跑后，溶解曲线双

则会造成耗材压扁，甚至造成机器故障；如果0.2ml加热模块用成0.1ml耗材，则会造成反应管的外壁和荧光定量PCR仪器的温控模块没有充分接触，从而出现热传导不充分，进而影响酶的活性，会引qPCR 溶解曲线没有峰出现，前端较高，是什么原因可能是没有检测出来，你的Ct是不是很大了，比如30以后，或者扩增曲线不正常

荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为：一般每加温一度，读一次信号，当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多，曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化，开始加(2)扩增曲线断裂或下滑比较典型的曲线下滑如上图所示，主要原因是模板浓度太高了，在基线期内就起峰了，仪器会默认起峰的线条仍为基线部分，将扩增曲线往基线位置下拉，因此你的曲线就

曾遇过这种情况，熔解曲线没有峰，虽然有扩增曲线和ct，但数据不可靠，后检查原因是模板和引物问题，换溶解曲线没有明显的峰说明没有扩增产物，这里面问题很多，比如温度条件、引物条件等等，最好还是能够找

1、扩增曲线形状异常a、扩增曲线不光滑：信号太弱，经系统矫正后产生。提高模板浓度重复实验。、扩增曲线断裂或下滑：模板浓度较高，基线的终点值大于Ct值。减小基线终点(C20161208yu楼主心血管内科认证医师条件设置问题，多谢楼上大神指点@剑藏鞘2018-06-18IP湖北湖北收

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