阳性和阴性一般是临床大夫在做检查或者是化验的时候给予的常规性的指标,通常阳性说明有意义而阴性说明正常,但是也有不同,要根据检查所显示的意义来决定,比如检查通常写双附件...
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pcr溶解曲线图怎么看 |
qpcr溶解曲线峰比较低,qpcr数据造假会被看出来吗
峰值低没有关系啊,如果同一个实验不同批次的峰值有高低差异,说明实验的扩增效率不一致,其实也就是模板浓度太低:这个大家减少稀释度重复实验就可以了,一般来说,未知浓度的样品先从最高浓度做起。模板降解:无解,请重新制备模板,重复实验吧小可怜~ 溶解曲线形状异常(1)杂峰在主峰之前,Tm 约为7
?ω? 4)模板浓度太低这个大家减少稀释度重复实验就可以了,一般来说,未知浓度的样品先从最高浓度做起。5)模板降解无解,请重新制备模板,重复实验吧小可怜~ 溶解曲模板浓度太低:这个大家减少稀释度重复实验就可以了,一般来说,未知浓度的样品先从最高浓度做起。模板降解:无解,请重新制备模板,重复实验吧小可怜~ 溶解曲线形
o(?""?o 可能原因:模板浓度太低;循环数太少;试剂扩增效率低。解决方案:提高模板量;提高循环数;用标准曲线测定扩增效率,提高镁离子浓度,换用扩增效率高的试剂。3. 荧光下降可能原因:存跟加cDNA的数值相差不大,熔解曲线的峰值也一样,原因是什么?同实验组的师妹的基因引物没问题,但内参有,为什么?03-17来自AndroidIP河南河南收藏回复点赞
溶解曲线就是为了区分样品是否有非特异性扩增和初始模板有无被污染的情况,我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,如果出现单一峰且峰值在Tm值位置出现,这就证明没有非特异性扩增,且初始熔解曲线常用来判断qPCR结果的特异性,理想的熔解曲线为单峰,异常的熔解曲线可能会出现双峰、杂乱等情况,下面我们来逐一分析。1.熔解曲线出现双峰1)双峰,杂
pcr溶解曲线的峰值太低横坐标是温度,每个温度点一个.一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值(不是强度本身).一开始加热的时候,虽然荧光强度比较强,但是由于2模板量低,建议提高模板量,使Ct值落在15-30之间。3仪器长时间未校准,建议定期进行仪器校准保养。熔解曲线常用来判断qPCR结果的特异性,理想的熔解曲线为单峰,异常的熔解曲线可能会出现双峰、杂乱
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