PCR平台期出现特别早正常吗,pcr仪体系选择错误有影响吗

PCR平台期出现特别早正常吗,pcr仪体系选择错误有影响吗

为什么PCR反应会有平台期，PCR存在平台期的常见原因是底物耗尽或多次循环后polymerase失活，反应速率下降，但是即使底物量趋于无限，酶活稳定，PCR也会有平台期，因为PCR反应本质上也是(一)合理分隔实验室：将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行，特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开。

综上所述，PCR平台期出现的原因比较复杂，根据我的经验，PCR循环数尽量不要超过40，以免进入平台期影响PCR存在平台期的常见原因是底物耗尽或多次循环后polymerase失活，反应速率下降，但是即使底物量趋于无限，酶活稳定，PCR也会有平台期，因为PCR反应本质上也是一个酶

＼　＿　／ 平台期有一定下降但不明显，由于模板过多所致。不用考虑引物二聚体的问题，已经在基线以下，没有意义。实在不放心可跑胶看下，但估计没有问题。注意PCR扩增反应平台期出现的早晚，与模版量因素关系最密切。聚合酶链式反应简称PCR英文全称：PolymeraseChainReaction，聚合酶链式反应，其英文PolymeraseChainReacti

来看一个典型的例子(图1),这是一组6个梯度稀释的标准品，扩增曲线指数期之后是漫长的线性扩增期，直到循环结束也没有出现明显的平台期。这样的结果能否得到理想的标准曲线用于定量分PCR每进行1个循环，DNA呈2倍的指数关系增长，不久达到平台期。起始DNA量越多扩增产物量便越早达到检出值也就是扩增曲线越早起峰。我们将已知浓度的标准品梯度稀释进行Real Time PCR,就

图5 是使用上述案例中相同模板和试剂进行实验的结果，可以看到扩增曲线明显上升的更快，平台期也早早就出现了，整个曲线是不是看起来让人极度舒适？图5. 调整反应体系后的扩增曲线这是PCR实验结果中有曲线出现末尾起跳但是没有完整扩增的现象。原因分析：(1)阴参曲线末尾起跳，通常表示存在污染；(2)复检样本，排除非特异性扩增的可能性；(3)正常样本也可存在