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荧光强度浓度标准曲线,测荧光强度数据的意义

标准曲线峰图起不来荧光定量 2023-10-13 19:20 954 墨鱼
标准曲线峰图起不来荧光定量

荧光强度浓度标准曲线,测荧光强度数据的意义

1、荧光定量PCR之绝对定量分析一一标准曲线的绘制1.绝对定量定义绝对定量是用己知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量将标准品稀释至不同浓度,作为模以VB2标准溶液的浓度为横坐标,相应发射光谱的峰值荧光强度为纵坐标,绘制用于VB2定量检测的标准曲线并得出相应的标准线方程。1.4.未知试样的测定取待测液2.50 mL 置于25 mL 容量瓶

标准的荧光定量PCR曲线是一条以循环数(cycle threshold,CT)为横坐标和荧光强度(△Rn)变化为纵坐标的“S"形荧光扩增曲线。我们将这条荧光扩增曲线分为背景基线期、指数扩增期和平台期荧光标度与浓度关系曲线0.000000226.5 120 0.000000448.5 0.00000060.00000088099.9 荧光度-罗丹明B曲线y=1E+08x+0.8R²=0.992 100 80荧光度60 40 20000.0000000.0000000

首先,原子荧光标准曲线就是指直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在荧光强度之间定量关系的曲线。绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其荧光强度即可在标准由于荧光分析仪是通过对样品产生的X射线的计算强度进行测定,再通过预先建立的计算强度与元素百分含量的曲线关系,来间接测定元素的含量。因此,标准曲线的是分析结果准确的前提

通常用标准品按照倍比稀释成至少5个浓度梯度,以起始拷贝数为横坐标,以Ct值为纵坐标,生成标准曲线,建立Ct值和拷贝数之间的线性关系。标准品的扩增曲线、熔解曲线和标准曲线根据标准当然,荧光强度的影响因素还有溶剂、温度、pH值、散射光等,在定量分析中需要加以考虑。荧光光谱定量分析的计算与其他光谱类似,包括标准曲线法、比例法等。9

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