qpcr溶解曲线的意义,pcr溶解曲线的意义

qpcr溶解曲线的意义,pcr溶解曲线的意义

溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线，顾名思义，其跟模板（或其浓度）没有关系，扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线，类似于电泳。那么你扩增几种基因就应上面的是反映在扩增曲线上面的。如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继续升温，双链断开，DNA分子

荧光定量pcr的溶解曲线理解：用Syber Green方法做完PCR后，用来判断产物是否相对专一。应结束后，逐渐加温。和Syber通过对扩增反应产物逐渐升温，同时监测每一步的荧光信号来制作熔解曲线。熔解曲线的纵坐标是荧光信号值，横坐标是温度值。通过观察产生的信号峰和对应温度，可以判断产物状态。理想

读一次信号.当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多.曲线的横坐标是温度，dR/dT 越大，表明荧光值变化最快。随着温度上升，达到Tm点时，大部分产物双链DNA解开，荧光值下降非常快。如果qPCR产物非常特异，熔解曲线在80-90之间会形成一个单峰(温度和qPCR产物长

•溶解曲线，是qPCR结果判定的第一要素。它的作用是判定目的基因是否得到扩增。理论上，当反应体系中仅是目标基因的扩增，才是有效扩增。•标准曲线，是qPCR结果判定的金标准。RT-qPCR分析软件是一个临床试验数据的处理方法，此软件包含有自动化计算结果，数据统计，自动化绘制脂肪图形。RT-qPCR在口腔致龋菌检测中的应用RT-qPCR在口腔致

2、溶解曲线：1)溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线，顾名思义，其跟模板(或其浓度)没有关系，扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线；2)一般SYBR法的目的基因在80~90℃之在做qPCR的时候，40个循环之后，都会插入一步(6):绘制溶解曲线。Fig1.PNG 结束以后会出现下面的结果Fig2.PNG RFU为荧光单位，随着温度的升高，荧光值一直在下降，表明DNA双链在变性成