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扩增曲线平台期不一致的原因 |
扩增曲线是一条直线,荧光定量pcr的应用场景
正常的扩增曲线包括四个阶段:基线期、指数增长期、线性增长期、平台期。2)基线(baseline):是背景曲线的一段,在扩增反应的最初数个循环里荧光信号变化不大,接近一条直线。3)荧如果是一条倾斜向上的直线,一般是漏加了下游引物或下游引物出了问题如果是没有任何扩增迹象说明是漏加
在进行PCR 之前,您(或您的PCR 仪中的软件)设置了一个阈值水平。这实际上是图表中的一条线,代表高于背景荧光的水平,它也在指数阶段开始时与反应曲线相交(图1)。C q值是您的样品引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。上下游引物的
奈氏曲线的绘制步骤_qpcr扩增曲线是直线本文由@浅墨_毛星云出品,首发于知乎专栏,转载请注明出处文章链接:https://zhuanlan.zhihu/p/69380665作为基于物理得出实时定量PCR重组质粒DNA动力学曲线。结果显示,重组质粒DNA动力学曲线为典型的S形扩增曲线,指数期较明显,平台期汇于一条直线上;指数区较明显,斜率大且固定(平行线);线性范围较广
一条线说明未起峰,未检测到目的基因。检查模板制备、引物、体系是否有问题。mxy5120 2022-06-13 有帮助起始模板浓度过高的话荧光PCR不会有太好的结果,建议1)4梯度标准品扩增曲线均呈“S”形。2)4条线三个间距均匀一致性好。3、阈值线如何设置阈值线与扩增曲线的交叉点,即为Ct值,与病原体检测载量密切相关。通常从感官上看,阈值线常设置在
基线从一开始就蹿飞了,软件当然找不到合适的基线,看着有两个孔像根本没有扩增,问几个问题一,你不知道你有没有定基线,一般情况下,第一个循环不会出现这么明显的荧光的。纵坐标是什么意思,没看懂。我看你曲线数量级跟误差的数量级差不多,很有可能这个曲线也
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