异常扩增曲线分析,qpcr阴性对照有扩增曲线

PCR各种异常扩增曲线图片 2023-07-09 21:54 200 墨鱼

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异常扩增曲线分析,qpcr阴性对照有扩增曲线

很多老师会遇到异常扩增曲线的困扰，接下来我们会结合几个实例，带着大家一起来看一下常见的异常扩增曲线的分析。1 pcr正常扩增曲线随着实验的进行，扩增产物不断累积，相应的荧光信异常扩增曲线——基线设不当定03基线设定不当的异常扩增曲线曲线特点：软件默认基线设定的扩增曲线呈波浪型，导致Ct值偏大，可能会被误判为阴性。原因分析：软件默认基线设定不准确造

目前市面上有的的荧光定量PCR预混液是不含有ROX的，当用此类试剂的时候，应该将ROX参比功能关闭，否则可能会出现图一左图所示的，扩增曲线异常的现象。遇到这种问题，可以在Plate SetupPCR 异常扩增曲线分析PCR 异常扩增曲线分析1. PCR 正常扩增曲线1. PCR 正常扩增曲线随着实验的进行，扩增产物不断累积，相应的荧光信号也不断在增加，每进行

异常图像：怪线状二内标污染特点：较为常见，表现为阴性对照、生理盐水，或者试剂空白内标出现阳性扩增曲线。原因分析：1、操作不规范，有标本残液或气溶胶通过原因分析：(1)仪器不稳定导致的扩增曲线异常(也可能突然停电或者电压不稳) 。2)尖峰向下，可能是卤素灯老化所致发射光源不稳定(指卤钨灯光源的激发器) 。3)尖峰向上，考虑仪器

异常曲线1:PCR扩增抑制原因分析：H07存在扩增抑制解决方案：将样本稀释后进行扩增(抑制物的影响可通过稀释样本消除) 异常曲线2:自动基线设置问题原因分析：自动基线问题解决方案：03 软件优化造成的异常扩增曲线【曲线特点】软件优化后扩增曲线向斜上方抬起，导致Ct减小，根据优化后扩增曲线会误判为阳性，但原始信号未有明显扩增。【原因

o(╯□╰)o 一、正常状态扩增曲线正常PCR扩增曲线呈“S”型，分为基线期、指数期、线性期、平台期。扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚，扩增曲线整体平行性好，基线平而无上扩增曲线以循环数为横坐标，荧光强度为纵坐标。样本扩增曲线是反应PCR进程的镜⼦，我们可以通过观察扩增曲线来评估PCR扩增效率，分析实验是否顺利进⾏。扩增曲线的正常与否，

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