qpcr融解曲线怎么看,qpcr有溶解曲线没有ct值

熔解曲线异常的原因 2023-06-05 22:18 911 墨鱼

熔解曲线异常的原因

qpcr融解曲线怎么看,qpcr有溶解曲线没有ct值

例如：如果熔解曲线为双峰，表示为出现非特异性扩增，则其对应的数据不可用。当满足上述条件后，还要考虑数据的重复性，这个重复性的好坏要用STDEV来衡量，STDEV<0.54. 溶解曲线(melt curve):表示随温度升高DNA 的双螺旋结构降解程度的曲线。总的DNA 双螺旋结构降解一半的温度称为熔解温度(Tm),不同序列的DNA,Tm 值不同。D

?＾? 上面的是反映在扩增曲线上面的。如图所示，这就是一个标准的real time-qPCR溶解曲线。下面从几个方面来解读：2、接着DNA双链分子由退火温度约60度，继续升温，双链断开，DNA分子熔解曲线(Dissociation curve)：随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。总的DNA双螺旋结构降解一半的温度称为熔解温度（Tm），不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm

∪０∪ 溶解曲线就是为了区分样品是否有非特异性扩增和初始模板有无被污染的情况，我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,如果出现单一峰且峰值在Tm值位置出现，这就证明没有非特异性扩增，且初始溶解曲线是用来验证扩增产物特异性的，如果产物是单一条带，溶解曲线就会出现单峰；如果有引物二聚体或其它非特异性扩增，就会出现至少两个峰。2 荧光阈值一般将

2、溶解曲线：1)溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线，顾名思义，其跟模板(或其浓度)没有关系，扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线；2)一般SYBR法的目的基因在80~90℃之使用染料法进行qPCR实验时，首先查看阴性对照的溶解曲线主峰是否跟阳性孔的主峰位置一致。如果一致，要看两者Cq相差多少，比如，针对某一种引物的实验样品Cq值为28

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