荧光pcr扩增曲线怎么看,荧光定量pcr标准品没有扩增

奇怪的pcr扩增曲线 2023-08-24 16:08 584 墨鱼

奇怪的pcr扩增曲线

荧光pcr扩增曲线怎么看,荧光定量pcr标准品没有扩增

目前市面上有的的荧光定量PCR预混液是不含有ROX的，当用此类试剂的时候，应该将ROX参比功能关闭，否则可能会出现图一左图所示的，扩增曲线异常的现象。遇到这种问题，可以在Plate Setup扩增反应阶段：采用两步法扩增，每一次PCR循环结束都检测并记录荧光信号，由此得到一条扩增曲线。熔解反应阶段：PCR扩增阶段结束后，设置一段熔解反应程序，检测并记录DNA双链产物解链过

＋△＋因此，在引物、模板、缓冲液、酶等都充足的理想状态下，荧光定量PCR的扩增曲线应该是这样的：理想状态下的扩增曲线然而，理想很疯狂，现实却很“性感”，看下面的“一、通过实时荧光PCR扩增曲线评价【扩增曲线图解读】实时荧光PCR由于每个循环要监测荧光信号值，因此都有拟合好的扩增曲线，通过扩增曲线可以很直观、准确的了解和评判试剂质量

＞﹏＜正常PCR扩增曲线呈“S”型，分为基线期、指数期、线性期、平台期。扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚，扩增曲线整体平行性好，基线平而无上扬现象。图1 正常扩增曲线理论上，PCR每个循1、首先我们看一下PCR正常扩增曲线，是比较平滑的S型曲线，见下图：2、常见异常结果分析2.1 案例1 2.1.1现象：常见单基因翘尾且出现较大的Ct值和单基因翘尾无Ct值现象，见下图：2.1.2

1、这里的三张图片分别展示了我们在做荧光定量PCR时提到的三个名称：扩增曲线，标准曲线，熔解曲线。1)扩增曲线：扩增曲线有两种展现形式，一种是线性，一种是对数形式。我们通常是用CTpcr扩增曲线图一般需要找专业的医生进行查看，才能够知道准确的结果。pcr是临床上一种比较常见的检查方式，主要是采集患者的分泌物，然后通过荧光定量pcr进行检

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