pcr异常曲线分析,荧光定量Pcr失败曲线

非洲猪瘟pcr扩增曲线 2023-06-04 17:24 281 墨鱼

非洲猪瘟pcr扩增曲线

pcr异常曲线分析,荧光定量Pcr失败曲线

耗材对于荧光定量PCR来说比较重要，很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的。常见的耗材相关问题包括：1)错误使用成普通PCR仪器所对应的耗材普通PCR耗材一般透光度比较差，会造耗材对于荧光定量PCR来说比较重要，很多异常的扩增曲线是由于耗材使用不当引起的。常见的耗材相关问题包括：1)错误使用成普通PCR仪器所对应的耗材普通PCR耗材

↓。υ。↓ PCR两个靶基因的扩增曲线呈斜直线型。打开网易新闻查看精彩图片02 分析：出现此种情况可以注意下检测完的反应管里面该孔位的标本是否出现反应液面明显低于其他反应孔位的液面，异常曲线1:PCR扩增抑制原因分析：H07存在扩增抑制解决方案：将样本稀释后进行扩增(抑制物的影响可通过稀释样本消除) 异常曲线2:自动基线设置问题原因分析：自动基线问题解决

📌 PCR 进阶：提高反转录的灵敏度一、扩增曲线异常(1)扩增曲线不光滑(图片来源于：丁香实验平台) 主要有两个原因：一是扩增信号太弱，经系统矫正后产生斜线，二是仪器本身的问题，可一、正常状态扩增曲线正常PCR扩增曲线呈“S”型，分为基线期、指数期、线性期、平台期。扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚，扩增曲线整体平行性好，基线平而无上扬现象。图1 正常扩增

对于荧光定量pcr的结果的判断，最直观的判断就是看扩增曲线是否正常。很多老师会遇到异常扩增曲线的困扰，接下来我们会结合几个实例，带着大家一起来看一下常见的异常扩增曲线的分析比如在做标准曲线的时候是否是梯度稀释的标准品，如果不是梯度稀释标准品，可能会引起标准曲线扩增效率或者R2 值异常；从冰箱冷冻中取出的试剂是否有混匀，如果试剂融化后没有混匀，这

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